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5-19
摘要豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)是危害養(yǎng)豬業(yè)的重要病原,精準檢測其在組織中的分布是疫病防控關(guān)鍵。本研究基于威尼德HB-500原位雜交儀,構(gòu)建PCV2特異性熒光原位雜交(FISH)檢測技術(shù)。通過設(shè)計靶向ORF2基因探針并優(yōu)化雜交條件,實現(xiàn)PCV2在豬腎細胞及組織樣本中的單細胞水平定位,為PCV2致病機制研究與臨床快速診斷提供高效技術(shù)平臺。一、引言豬圓環(huán)病毒2型(Porcinecircovirustype2,PCV2)是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎腎病綜合征(P...
5-19
摘要黑麥染色質(zhì)檢測對麥類作物遺傳改良至關(guān)重要。本研究利用熒光原位雜交技術(shù)(FISH),結(jié)合威尼德HB-500原位雜交儀,針對黑麥染色體特異性序列進行精準定位。通過設(shè)計特異性探針并優(yōu)化雜交條件,成功在根尖細胞與花粉母細胞中清晰顯示黑麥染色質(zhì)分布,為麥類遠緣雜交育種及染色體進化研究提供了高效技術(shù)方案。一、引言黑麥(Secalecereale)作為麥類作物重要的遺傳資源,其染色質(zhì)中蘊含的抗病、抗逆基因是小麥品種改良的關(guān)鍵靶點。準確檢測黑麥染色質(zhì)在種子后代中的存在與分布,是麥類遠緣雜...
5-19
摘要胚胎植入前性別診斷對預防伴性遺傳病至關(guān)重要。本研究應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù),借助威尼德HB-500原位雜交儀,對人類植入前胚胎進行性別鑒定。通過特異性探針雜交性染色體,成功在單細胞水平實現(xiàn)精準檢測,為輔助生殖技術(shù)中遺傳病防控提供了可靠方法。一、引言在輔助生殖領(lǐng)域,胚胎植入前遺傳學診斷(PGD)是預防遺傳性疾病傳遞的關(guān)鍵技術(shù)。伴性遺傳病如血友病、色盲等,其致病基因位于性染色體上,準確的胚胎性別鑒定是阻斷此類疾病傳遞的重要環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)的性別鑒定方法如聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR),雖具有...
5-19
摘要黃矮病嚴重威脅小麥生產(chǎn),鑒定抗病新種質(zhì)至關(guān)重要。本研究運用基因組原位雜交技術(shù),借助威尼德HB-500原位雜交儀,對小麥新種質(zhì)進行檢測。成功鑒定出抗黃矮病新種質(zhì),明確其染色體組成及外源染色體來源,為小麥抗病育種提供了優(yōu)異材料與理論依據(jù)。一、引言小麥作為全球重要的糧食作物,其產(chǎn)量和品質(zhì)受多種病害影響,黃矮病是其中危害較為嚴重的病害之一。黃矮病由病毒引起,可導致小麥葉片變黃、植株矮化、產(chǎn)量下降,給小麥生產(chǎn)帶來巨大損失。培育和利用抗黃矮病小麥品種是解決該問題經(jīng)濟有效的途徑,而鑒定...
5-17
摘要本研究聚焦桑樹查爾酮異構(gòu)酶(CHI)基因,通過RT-PCR技術(shù)從桑樹葉片中克隆獲得Morus_CHI基因全長cDNA序列。借助威尼德GenePulserX2雙波全能型電穿孔儀,將重組表達載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3),分析該基因在不同組織及脅迫處理下的表達特性,為桑樹次生代謝調(diào)控研究提供理論依據(jù)。引言查爾酮異構(gòu)酶(CHI)是黃酮類化合物合成途徑中的關(guān)鍵酶,在植物抗逆響應(yīng)與藥用成分合成中具有重要作用。桑樹作為藥食同源植物,其CHI基因的功能解析對挖掘黃酮類活性成分合成機...
5-17
摘要人源氨肽酶N(hAPN)在腫瘤侵襲、病毒感染等生理病理過程中具關(guān)鍵作用。本研究通過RT-PCR克隆hAPN全長編碼區(qū),構(gòu)建pET-32a重組載體,借助威尼德MiniPulser399經(jīng)濟款電穿孔儀優(yōu)化大腸桿菌BL21轉(zhuǎn)化條件,實現(xiàn)hAPN在原核系統(tǒng)中的高效可溶性表達,為酶學特性分析及靶向藥物研發(fā)提供標準化技術(shù)方案。引言人源氨肽酶N作為鋅離子依賴性蛋白酶,廣泛參與細胞外基質(zhì)降解、信號轉(zhuǎn)導及病原識別等重要生物學過程。其異常表達與多種惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān),同時作為冠狀病毒...
5-17
摘要本研究聚焦馬鈴薯抗逆相關(guān)WRKY6基因,通過RT-PCR技術(shù)克隆目的基因,構(gòu)建pET-28a重組表達載體,借助威尼德GenePulserX2雙波全能型電穿孔儀優(yōu)化農(nóng)桿菌GV3101轉(zhuǎn)化體系,實現(xiàn)WRKY6蛋白在擬南芥原生質(zhì)體中的高效瞬時表達,為解析馬鈴薯逆境響應(yīng)分子機制及抗逆品種改良提供關(guān)鍵靶標與技術(shù)支撐。引言馬鈴薯作為全球重要的糧菜兼用作物,其產(chǎn)量與品質(zhì)受干旱、鹽漬等逆境脅迫影響顯著。WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族在植物抗逆信號通路中扮演核心調(diào)控角色,其中WRKY6基因被證實參與...
5-17
摘要本研究針對豬流行性腹瀉病毒(PEDV)M基因片段開展原核表達研究。通過RT-PCR擴增目的片段,構(gòu)建pET-32a重組載體,借助威尼德GenePulser630指數(shù)衰減波電穿孔儀優(yōu)化大腸桿菌Rosetta(DE3)轉(zhuǎn)化條件,實現(xiàn)M蛋白高效可溶性表達,為PEDV診斷抗原制備及疫苗研發(fā)提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。引言豬流行性腹瀉(PED)是由PEDV引發(fā)的急性腸道傳染病,嚴重危害全球養(yǎng)豬業(yè)。病毒膜蛋白(M蛋白)作為病毒結(jié)構(gòu)的核心組分,其原核表達產(chǎn)物在病毒檢測試劑開發(fā)及亞單位疫苗研究中具...